使用RT-PCR試劑盒時您所需要注意的事項
點擊次數：609 更新時間：2020-11-19
RT-PCR試劑盒在實驗中可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如大便和某些分泌物)。血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外，別的成份均對等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝集、縮短后即可取得。
除特殊情況外，在醫(yī)學查驗中均以血清作為檢查標本。在ELISA中血漿和血清可對等運用。血清標本可按慣例方法收集，應留神防止溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本或許會添加非特異性顯色。
RT-PCR試劑盒的使用注意事項：
1、反復凍融會使蛋白效價降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。
2、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時。
3、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
4、凍結標本溶解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上強烈震蕩。
5、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
6、渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。
7、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
8、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。
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